Kudoksen mikrorake - Tissue microarray
Kudosmikrosäteet (myös TMA: t) koostuvat parafiinilohkoista , joissa jopa 1000 erillistä kudosydintä on koottu ryhmämuodolla multipleksisen histologisen analyysin mahdollistamiseksi .
Historia
Kudosten molekulaarisen kliinisen analyysin suurimpia rajoituksia ovat toimenpiteiden hankala luonne, diagnostisten reagenssien rajoitettu saatavuus ja rajoitettu potilaan näytekoko. Kudosmikrosirutekniikka kehitettiin näiden ongelmien ratkaisemiseksi.
Monikudoslohkot otti H. Battifora ensimmäisen kerran käyttöön vuonna 1986 ns. "Monituumorinen (makkara) kudoslohkolla" ja muutti vuonna 1990 sen parannuksella, "shakkilautakudoksen lohko". Vuonna 1998 J. Kononen ja yhteistyökumppanit kehittivät nykyinen tekniikka, jossa käytetään uutta näytteenottomenetelmää säännöllisen kokoisten ja muotoisten kudosten tuottamiseksi, jotka voidaan järjestää tiheämmin ja tarkemmin.
Menettely
Kudosmikrosirutekniikassa onttoa neulaa käytetään halkaisijaltaan jopa 0,6 mm: n kudosydinten poistamiseen parafiiniin upotettujen kudosten mielenkiintoisilta alueilta, kuten kliiniset biopsiat tai kasvainnäytteet . Nämä kudosytimet työnnetään sitten vastaanottajaparafiinilohkoon tarkalleen sijoitetulla ryhmäkuviona. Kohdat tästä lohkosta leikataan käyttämällä mikrotomia , asennettu objektilasille ja sitten analysoida millä tahansa menetelmällä standardin histologista analyysiä varten. Jokainen mikropiirilohko voidaan leikata 100-500 osaan, jotka voidaan altistaa itsenäisille testeille. Kudosmikrosoluissa yleisesti käytettävät testit sisältävät immunohistokemian ja fluoresoivan in situ -hybridisaation . Kudossiruina ovat erityisen käyttökelpoisia analyysin syövän näytteitä.
Yksi muunnelma on jäädytetty kudosryhmä .
Käytä tutkimuksessa
Kudosmikrosäteiden käyttö yhdessä immunohistokemian kanssa on ollut edullinen menetelmä syövän biomarkkereiden tutkimiseen ja validointiin erilaisissa määritellyissä syöpäpotilaiden kohorteissa . Mahdollisuus koota suuri määrä edustavia syöpänäytteitä määritellystä potilasryhmästä, jolla on myös vastaava kliininen tietokanta, tarjoaa tehokkaan resurssin tutkia, kuinka erilaiset proteiinin ilmentymismallit korreloivat erilaisten kliinisten parametrien kanssa. Koska potilasnäytteet kootaan samaan lohkoon, leikkeet voidaan värjätä samalla protokollalla kokeellisen vaihtelun ja teknisten esineiden välttämiseksi. Kliinisiä syöpäpotilaiden kohortteja ja vastaavia kudosmikrosarjasettejä on käytetty tutkimaan syövän diagnostisia, ennustavia ja hoitoa ennustavia biomarkkereita useimmissa syöpämuodoissa, mukaan lukien keuhko-, rinta-, paksusuoli- ja munuaissolusyöpä.
Immunohistokemiaa yhdistettynä kudosmikrosäteisiin on myös käytetty menestyksekkäästi laajamittaisissa pyrkimyksissä luoda proteiiniekspressiokartta globaalimmassa mittakaavassa.
Katso myös
Viitteet
- Battifora H: Monituumorinen (makkara) kudoslohko: uusi menetelmä immunohistokemiallisten vasta-aineiden testaukseen. Lab Invest 1986, 55: 244 - 248.
- Battifora H, Mehta P: Checkerboard-kudoslohko. Parannettu monikudosohjauslohko. Lab Invest 1990, 63: 722-724.
- Kononen J, Bubendorf L, Kallioniemi A, Barlund M, Schraml P, Leighton S, Torhorst J, Mihatsch MJ, Sauter G, Kallioniemi OP: Tissue microarrays for high-throughput molekular profilating of kasvaimen näytteet. Nat Med 1998, 4: 844-847.
Ulkoiset linkit
-
Tiedostoja aiheesta Tissue mikrosirujen osoitteessa Wikipedia - Kansallinen syöpäinstituutin kudosryhmä -tutkimusohjelma
