Lyse

Zelllyse ist der Prozess des Bruchs der Zellmembran von Zellen oder Bakterien , der die Freisetzung von Zellmaterial bewirkt, verursacht durch Lysine . ]

Alle Zellen haben eine Membran aus Phospholipiden , die den Zellinhalt von der extrazellulären Umgebung trennt. Phospholipide sind amphipathisch und haben eingebettete Membranproteine. Die Beschaffenheit von Lipiden und Proteinen variiert je nach Zelltyp.

In der tierischen Zelle ist die Membran die einzige Barriere, aber in Pflanzen und Bakterien ist die Membran von einer Zellwand umgeben. Die bakterielle Zellwand besteht aus Peptidoglykanen . Diese Arten von extrazellulären Barrieren verleihen den Zellen Form und Festigkeit.

Die für den Zellaufbruch gewählte Technik muss den Ursprung des Gewebes berücksichtigen, um festzustellen, ob es leicht oder schwer zu zerstören ist. Außerdem muss das Verfahren mit der zu verarbeitenden Materialmenge und deren Anwendungen kompatibel sein.

Es gibt auch eine Zytolyse , die durch Lymphozyten (Zellen im Blutstrom, die als Abwehr dienen) vermittelt wird, die auf ihrer Oberfläche Lymphozytenrezeptoren exprimieren (TCR = T-Zellrezeptor), die an den Antigen-Molekül-Komplex des Haupthistokompatibilitätskomplexes I binden, und anschließend sie sezernieren Lymphokine und Perforine , die in der infizierten oder neoplastischen Zelle Ionenkanäle produzieren und dann zur Lyse und anschließendem Zelltod führen. Es sollte klargestellt werden, dass die TCRs der T-Lymphozyten die Antigene in Wirtszellen erkennen, die mit Viren infiziert sind, oder in jenen Zellen, die eine neoplastische (Tumor-)Transformation durchlaufen haben.

Arten der Lyse

Abhängig von den Methoden, die zur Durchführung des Membranbruchprozesses verwendet werden, gibt es zwei Arten der Lyse: chemische Lyse oder mechanische Lyse.

Mechanische Lyse oder durch physikalische Methoden

• Optik: Es besteht aus der Anwendung von Laserimpulsen zur Lyse von Zellen. Es ist nützlich, wenn man sich auf eine einzelne Zelle konzentriert, da die Laserleistung moduliert und auf einen bestimmten Ort gerichtet werden kann. ]

• Flüssigkeitshomogenisierung: Die Zellen werden aufgebrochen, indem sie gezwungen werden, sehr kleine Räume zu passieren.
• Sonifikation: Hochfrequente Wellen brechen Zellen. ]
• Einfrieren: Kontinuierliche Einfrierzyklen brechen die Zelle auf und führen zur Kristallbildung .

Chemische Lyse

• Alkalische Lyse: Sie basiert auf der Erzeugung von OH-Ionen, um den Zelllyseprozess zu fördern. ]
• Zelllyse durch Detergenzien: Es ist eine schonendere Art, die Zellmembran durch Detergenzien oder chaotrope Mittel aufzubrechen, die eine Auflösung der Zellmembran ermöglichen. ]

Detergenzien brechen die Lipidbarriere auf, indem sie Proteine ​​solubilisieren und Lipid-Lipid-, Lipid-Protein- und Protein-Protein-Wechselwirkungen stören. Detergenzien assoziieren wie Lipide miteinander und binden an hydrophobe Oberflächen. Sie bestehen aus einem polaren hydrophilen Kopf und einem unpolaren hydrophoben Schwanz.

Es ist kein Standardprotokoll verfügbar. Das Waschmittel hängt von der Anwendung ab, die Sie ihm geben möchten. Viele Studien, die Elektrophorese verwenden, verwenden typischerweise SDS, um Proteine ​​vollständig zu denaturieren. Die Wahl des Detergens für die Zelllyse hängt auch vom Zelltyp ab. Auch die verwendeten Puffer, der pH -Wert , die Salzkonzentration und die Temperatur sind für die Wahl des richtigen Waschmittels zu berücksichtigen .

Siehe auch

• Autolyse